EFFECT OF ANTIOXIDANT COMPLEX ON THE PROCESSES OF ADHESION IN THE EXPERIMENT.pdf ВВЕДЕНИЕ Спаечная болезнь брюшной полости на сегодняшний день официально является отдельной нозологической формой заболевания, а варианты лечения и профилактики её всё больше привлекают пристальное внимание различных специалистов [1, 4-6]. Заболевание характеризуется наличием внутрибрюшных сращений, основными причинами которых являются: травмы брюшины и внутренних органов во время операции, инородные тела, инфицирование брюшной полости, раздражение брюшины лекарственными средствами, местная ишемия тканей, хронические заболевания органов брюшной полости, врожденные спайки, образующиеся при пороках развития брюшины в эмбриональном периоде, системные заболевания соединительной ткани, склонность к образованию гипертрофических и келоидных рубцов, аллергическая предрасположенность - аутоиммунный фон или сенсибилизация внешними агентами и другие [2]. Наибольшую актуальность данная патология представляет для абдоминальных хирургов, что объясняется высокой частотой ее развития после хирургических вмешательств (67-93%). По данным Международного спаечного общества, по поводу спаечной болезни брюшной полости ежегодно в хирургических стационарах лечится 1% всех ранее прооперированных пациентов, рецидивы после хирургического адгезиолизиса составляют от 32 до 71%, а распространенность спаечной болезни колеблется от 1,5 до 10%. Из числа больных спаечной болезнью в течение года только 22,1% мужчин и 17,1% женщин полностью сохраняют работоспособность, а более 30% повторно обращаются за медицинской помощью [5-7]. Для профилактики спаечного процесса брюшной полости используют множество различных мероприятий [3-5], однако высокая частота возникновения спаек в брюшной полости и постоянно увеличивающееся количество пациентов, страдающих спаечной болезнью, заставляют искать новые пути решения этой важной социальномедицинской проблемы. В последние годы возрос интерес к использованию в медицине препаратов растительного происхождения [8, 9]. В НИИ фармакологии Вопросы реконструктивной и пластической хирургии №1(48) март’2014 32 Тихонов В.И., Плотников М.Б., Логвинов С.В., Грищенко М.Ю., Шкатов Д.А. СО РАМН разработана смесь диквертина с аскорбиновой кислотой, которая относится к флавоноидам растительного происхождения. Многогранное действие этих соединений на организм, не вызывающее при этом каких-либо токсических, аллергических и иммунодепрессивных реакций, позволяет широко использовать их в клинической практике [10-13]. Диквертин - гидролизированный по гетероциклическому фрагменту аналог дигидрокверцетина с химической формулой 3,3’,4’,5,7-пентагидроксифлаван. Его получают их измельченной древесины лиственницы даурской (Larix dаhuriса Т.) и лиственницы сибирской (Larix sibirica L.) [15]. Диквертин относится к флавоноидам растительного происхождения и содержит в своем составе 90% дигидрокверцетина и 10% биогенных предшественников - дегидрокемпфенола и нарингенина. Как представитель флавоноидов он оказывает нормализующее воздействие на ферментативные системы клетки, регулируя эндоцитоз и активность лизосомальных ферментов; ингибирует активность ферментов, таких как протеинкиназа С, тирозинкиназа, фосфолипаза А2, участвующих в процессе активации клетки, фосфодиэстераза. Диквертин оказывает белковоанаболическое действие, вследствие чего увеличивается число эритроцитов в периферической крови и повышается содержание в них гемоглобина. Он обладает антидиабетическим действием за счет уменьшения накопления сорбита в эритроцитах человека [16]. По данным литературы [10-12], совместное применение этих двух активных биогенных веществ: • укрепляет стенки сосудов и капилляров, повышая их прочность и эластичность; • препятствует формированию внутренних кровяных тромбов; • снижает вязкость и свертываемость крови, ослабляет агрегацию эрит-роцитов; • препятствует возникновению воспалительных процессов в организме, обладает противоотечным действием; • тормозит действие гиалуронидазы - фермента, нарушающего целостность сосудистой стенки. Диквертин в сочетании с аскорбиновой кислотой действует не только как синергист. Связывая ионы железа в биологических системах в неактивные комплексы, диквертин предотвращает прооксидантный эффект аскорбиновой кислоты. Оба компонента способны обратимо окисляться, взаимодействуя со свободными радикалами, и вновь взаимно восстанавливаться. воспалительной и антиоксидантной активностью, а также улучшающего микроциркуляцию, с целью профилактики спаечных осложнений в послеоперационном периоде представляется патогенетически обоснованной при операциях на органах брюшной полости. Цель работы: провести оценку влияния антиоксидантного комплекса на процессы спайкообразования в сравнении с известными антиадгезивными средствами в эксперименте Задачи исследования: 1) оценить эффективность антиоксидантного комплекса в условиях развития спаечных сращений в брюшной полости у экспериментальных животных; 2) оценитьэффективность препарата «Полиглюкин» в условиях развития спаечной болезни у экспериментальных животных; 3) оценить эффективностьпрепарата «Мезогель» в условиях развития спаечной болезни у экспериментальных животных; 4) сравнить антиадгезивный эффект антиоксидантного комплекса, препаратов «Полиглюкин» и «Мезогель» в условиях развития спаечных сращений брюшины. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ Эксперимент выполнен на кафедрах общей хирургии (заведующий каф. - д-р мед. наук, профессор В.И. Тихонов), гистологии, эмбриологиии цитологии (заведующий кафедрой - д-р мед. наук, профессор С.В. Логвинов), в ЦНИЛ СибГМУ(директор - д-р мед. наук, профессор А.Н. Байков). Опыт проводился на 144 белых здоровых крысахсамцах линии Вистар массой тела 200-250 г. Выбор крыс в качестве экспериментального материала обусловлен тем, что их использование экономически выгодно, в первую очередь при исследованиях, в которых для достоверности статистических показателей необходимо большое число наблюдений; во-вторых, проведенный анализ литературы показал, что слепая кишка грызунов хорошо зарекомендовала себя в качестве объекта для моделирования спаечной болезни брюшной полости. В качестве способа спайкообразования у экспериментальных животных нами была взята известная модель (А.Д. Мясников, В.А. Липатов и соавторы, уд. на рацпред. 1544-03 от 03.03.2003 г.) [7]. Крысы под наркозом фиксировались в положении на спине. После предварительного удаления волосяного покрова с передней брюшной стенки в условиях операционной выполнялась лапаротомия. Брюшная стенка в подвздошной области справа после предварительной гидравлической препаровки париетальной брюшины десерозировалась на площади 1 см2. Вся по Таким образом, попытка использования анти-верхность слепой кишки подвергалась щадящей оксидантного комплекса, обладающего противо-скарификации до появления на ее поверхности №1(48) март’2014 Вопросы реконструктивной и пластической хирургии Экспериментальная хирургия 33 «кровавой росы». Таким образом создавались две соприкасающиеся раневые поверхности: одна стандартных размеров, другая покрывала всю поверхность слепой кишки, нивелируя индивидуальные различия животных по их величине, что стандартизирует модель. Экспериментальные животные были разделены на 4 группы. Всем животным проводилось оперативное вмешательство и создавались условия для развития спаечного процесса по описанной выше методике. Группа №1 ( основная) - 36 крыс. Животные на фоне оперативного вмешательства в течение 5 сут получали внутрижелудочно антиоксидантный комплекс. Первое введение композита осуществлялось за двое суток до операции из расчёта 20 мг/кг диквертина и 50 мг/кг аскорбиновой кислоты в сут. Непосредственно перед введением сухое вещество соединяли с 1% раствором крахмала. Полученную взвесь животные получали внутрижелудочно с помощью жесткого зонда. Группа №2 (группа сравнения) - 36 крыс. Животным после травмирования висцеральной и париетальной брюшины в брюшную полость заливался препарат «Полиглюкин» в объеме 3 мл (как довольно часто применяемый препарат в ургентной хирургии). Далее брюшная полость ушивалась наглухо. Группа №3 (вторая группа сравнения) - 36 крыс. Животным после травмирования висцеральной и париетальной брюшины в брюшную полость вводился препарат «Мезогель» в объеме 1,5 мл (как наиболее эффективный современный противоспаечный препарат). Группа №4 (контрольная) - 36 крыс. Животным производилось только травмирование висцеральной и париетальной брюшины, и брюшная полость ушивалась наглухо. Необходимо отметить, что для чистоты эксперимента животные из групп сравнения и группы контроля также получали внутрижелудочно 1%-й раствор крахмала в равнообъёмном количестве. Животные выводились из эксперимента на 3-и, 7-е и 14-е сут после оперативного вмешательства - по 12 животных из каждой группы в указанные сроки. Во всех группах оценивались: • количественная характеристика спаечного процесса; • виды спаечных сращений; • локализация спаечного процесса; • макро- и микроскопические изменения в зоне поврежденных тканей слепой кишки и париетальной брюшины. Полученные результаты были обработаны с применением критерия .2 для таблиц сопряженности n.n в случае выявления достоверности различий качественных признаков (долей, выра женных в %) и Н-критерия Краскалла-Уоллиса при выявлении достоверности различий количественных признаков (суммарная оценка уровня спаечных процессов). Достоверными считали различия, уровень значимости которых был менее 0,05. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ Количество животных со спайками и характер спаек определяли в каждой группе в момент выведения из эксперимента - на 3-и, 7-е и 14-е сут. Полученные результаты представлены в табл. 1. Наименьшее количество животных со спайками обнаружено в группе с использованием антиоксидантного комплекса (АОК) - 8 из 36 (22,2%). Также хороший результат зафиксирован в группе с использование препарата «Мезогель », где спайки сформировались у 14 животных (38,8%). Результаты, полученные при использовании препарата «Полиглюкин», практически не отличались от группы контроля и составили 22 (61,1%) и 25 (69,4%) животных соответственно. Высокодостоверные различия получены между 1-й и 2-й и 1-й и 4-й группами (р1-2=0,002; р1-40,05 р1-4>0,05 8 (66,6%) 4 (33,3%) 10 (83,3%) 22 (61,1%) 100/0 0/100 0/100 р2-1=0,049 р2-4=0,05 р2-1=0,002 р2-1=0,002 р2-4>0,05 р2-4>0,05 р2-4>0,05 р2-4=0,50 р2-1=0,50 р2-4=0,19 р2-4=0,62 5 (41,6%) 5 (41,6%) 4 (33,3%) 14 (38,8%) 100/0 57,1/42,9 0/100 р3-1=0,33 р3-1=0,33 р3-1=0,32 р3-4=0,017 р3-4>0,05 р3-4>0,05 р3-4>0,05 р3-4=0,11 р3-4=0,21 р3-4=0,21 9 (75%) 9 (75%) 7 (58,3%) 25 (69,4%) 100/0 81,8/18,2 0/100 .2=12,8; .2=11,4; .2=16,5 .2=0; .2=8,9; .2=0; р=0,046 р=0,08 р=0,011 р=1,0 р=0,03 р=1,0 ВИДЫ СПАЕЧНЫХ СРАЩЕНИЙ Отдельные виды спаечных сращений имеют различные значения и клинические проявления (табл. 2). На 3-и сут эксперимента в группах с полиглюкином, мезогелем и группе контроля преобладали плоскостные спаечные сращения, тогда как в группе АОК - плёнчатые. На 7-е сут во всех исследуемых группах большинство спаек представляли собой плоскостные сращения. На 14-е сутки в группах с полиглюкином и контрольной в большинстве случаев выявлены плёнчатые спаечные сращения, в группе с мезогелем - плоскостные, а в группе АОК - равное количество плёнчатых и плоскостных. В целом во всех группах преобладали плоскостные спайки практически во все сроки исследования. Однако в эксперименте отмечено, что в группе с использованием АОК значительно реже формируются шнуровидные и плоскостные спаечные сращения, возможно, благодаря его системному влиянию на организм. ЛОКАЛИЗАЦИЯ СПАЕЧНОГО ПРОЦЕССА Локализация спаек описывалась в зависимости от того, какие органы или отделы органа были вовлечены в спаечный процесс (табл. 3). Локализация спаечного процесса в группах с использованием противоспаечных средств во всех контрольных точках практически однотипна (сальник-шов, сальник-купол слепой кишки, сальник-париетальная брюшина) и отличаетсятолько в количественном отношении. В группе же контроля спаечный процесс дополнительно формируется между интактной кишкой и швом (Ик-Ш - 2 (6,1%)), и у 6 животных (18,2%) в него вовлекаются 3 структуры: кишка-париетальная брюшина-шов (К-Пб-Ш), то есть без проведения противоспаечных мероприятий спаечный процесс захватывает более широкие площади. Выявлено, что спаечный процесс в каждой группе и во всех группах в целом наиболее часто формируется между сальником и послеоперационным швом - в 45 случаях (51,1%), реже - между сальником и поврежденным куполом слепой кишки - в 23 случаях (26,1%) и париетальной брюшиной - в 11 (12,5%). В целом же сальник принимает наибольшее участие в спайкообразовании во всех группах - у 79 животных (89,8%). Довольно часто в спаечный процесс вовлекается послеоперационный шов - у 54 (61,4%) из 88 животных. Поврежденные поверхности (купол слепой кишки и париетальная брюшина) участвуют в формировании спаек всего в 41 случае (46,6%). Таким образом, послеоперационный шов оказывается более агрессивным фактором в образовании спаек, нежели десерозирование различных поверхностей брюшины. Очевидно, к этому приводят травма и кровоизлияния при рассечении и ушивании брюшины, её подсыхание и ишемия при завязывании швов. На это следует обратить особое внимание при проведении лапаротомии и ушивании раны. №1(48) март’2014 Вопросы реконструктивной и пластической хирургии Экспериментальная хирургия 35 Таблица 2 Сравнительная характеристика видов спаечных сращений в брюшной полости в зависимости от способа профилактики Вид спаек 3-и сут Шнуровидные Плоскостные Пленчатые 7-е сут Шнуровидные Плоскостные 14-е сут Шнуровидные Плоскостные Пленчатые Группы в зависимости от вида профилактики спаек Полиглю АОК кин Мезогель Контроль 1 2 3 4 1 (8,3%) 0 0 2 (16,7%) 1 (8,3%) 8 (66,7) 5 (41,7%) 7 (58,3%) 2 (16,7%) 0 0 1 (8,3%) 0 0 0 2 (16,7%) 3 (25%) 4 (33,3%) 5 (41,7%) 7 (58,3%) 0 0 1 (8,3%) 2 (16,7%) 1 (8,3%) 4 (33,3%) 4 (33,3%) 3 (25%) 1 (8,3%) 6 (50%) 0 4 (33,3%) Уровень значимости различий с контролем 1-4 (травма) 2-4 3-4 1,0 0,027 1,0 0,49 1,0 1,0 0,49 0,68 1,0 0,49 0,21 0,49 0,41 0,49 0,68 0,49 0,59 0,32 0,49 1,0 0,68 1,0 1,0 0,09 Статистика .2 .2=3,9; р=0,27 .2=9,7; р=0,021 .2=3,9; р=0,27 .2=6,2; р=0,10 .2=3,0; р=0,38 .2=3,9; р=0,27 .2=2,7; р=0,45 .2=10,7; р=0,013 Таблица 3 Сравнительная характеристика локализации спаечного процесса в брюшной полости в зависимости от способа профилактики Общее число С-Ш С-К С-Пб Ик-Ш К-Ш К-Пб-Ш спаек АОК (36 животных) 10 (100%) 6 (60%) р1-4=0,33 1 (10%) р1-4=0,57 2 (20%) р1-4=0,52 0 (0%) р1-4=0,58 1 (10%) р1-4=0,23 0 (0%) р1-4=0,18 Полиглюкин (36 животных) 26 (100%) 16 (61,5%) р2-4=0,17 р2-1=0,61 10 (38,5%) р2-4=0,041 р2-1=0,10 0 (0%) р2-4=,047 р2-1=0,67 0 (0%) р2-4=0,31 0 (0%) р2-1=0,28 0 (0%) р2-4=0,025 Мезогель (36 животных) 19 (100%) 8 (42,1%) р3-4=0,52 р3-1=0,30 7 (36,8%) р3-4=0,08 р3-1=0,14 4 (21,0%) р3-4=0,43 р3-1=0,67 0 (0%) р3-4=0,40 0 (0%) р3-1=0,34 0 (0%) р3-4=0,05 Контрольная группа (36 животных) 33 (100%) 15 (45,4%) 5 (15,1%) 5 (15,1%) 2 (6,1%) 0 (0%) 6 (18,2%) Всего 88 (100%) 45 (51,1%) 23 (26,1%) 11 (12,5%) 2 (2,3%) 1 (1,1%) 6 (6,8%) Примечание: С - сальник; Ш - послеоперационный шов; К - купол слепой кишки; Пб - париетальная брюшина; Ик - интактная кишка Вопросы реконструктивной и пластической хирургии №1(48) март’2014 36 Тихонов В.И., Плотников М.Б., Логвинов С.В., Грищенко М.Ю., Шкатов Д.А. ИЗМЕНЕНИЯ ОКРУЖАЮЩИХ ТКАНЕЙ Особое значение имеет динамика изменений, характеризующих выраженность воспалитель Представляют большой интерес изменения ной и сосудистой реакций, таких как отёчность, поврежденных тканей как при формировании выпадение фибрина, инфильтрация, синюшность спаечного процесса, так и в условиях профилак и петехиальные кровоизлияния (табл. 4). тики спайкообразования. Таблица 4 Сравнительная характеристика макроскопических изменений повреждённых тканей в зависимости от вида профилактики спаек Группы животных контрольные точки критерии оценки состояния повреждённых тканей отечность фибрин петехии синюшность инфиль трация АОК, 36 животных (1) 3-и сут 4 (33,3%) р1-2=0,001 р1-3=0,04 р1-4=0,50 1 (8,3%) р1-4=0,08 3 (25%) р1-2=1,0 р3-1=0,40 р1-4=0,11 0 0 7-е сут 0 р1-2

Скачать электронную версию публикации