Toxic elements in ticks determined by atomic emission spectrometry to assess their effect on infectious diseases with na.pdf Введение В последние годы на территории Российской Федерации отмечается значительный рост количества клещей. В Томской области из всех клещей рода Ixodes особенно распространены таежный клещ (Ixodes persulcatus 47 В.И. Отмахов, Е.В. Петрова, И.С. Кускова, И.С. Черепанова Sch.) [1], Павловского (Ix. pavlovskyi Pom.), реже - луговой клещ (Derma-centor reticulatus Fabr. и Haemaphysalis concinna Koch.) [2]. Иксодовые клещи (иксодиды) - специфические переносчики возбудителей таких болезней, как клещевой энцефалит, сыпной клещевой тиф, возвратный клещевой тиф, туляремия, эрлихиоз, бабезиоз, клещевой боррелиоз (болезнь Лайма), геморрагическая лихорадка, риккетсиоз, лихорадка [3]. Сегодня отмечается тенденция к формированию стойких очагов клещевых инфекций на городских и пригородных территориях. Поэтому основное внимание экологов и эпидемиологов привлечено к поиску причин возникновения природноочаговых инфекций, одной из которых является техногенное загрязнение окружающей среды. В результате техногенной деятельности человека в природную среду попадает большое количество ионов тяжелых и токсичных металлов, которые оседают в почве, попадают в поверхностные и грунтовые воды. Далее происходит их продвижение от растений к животным и птицам, а затем - к клещам, питающимся кровью последних. Накопление в клещах токсичных и условно токсичных элементов, особенно таких, которые участвуют в процессах метаболизма в живых организмах (Cd, Pb и др.), влияет на биологию и морфологию клещей, приводя к снижению иммунитета кровососов, что способствует повышению восприимчивости клещей к патогенным агентам. В результате появляется и быстро увеличивается популяция клещей-мутантов рода Ixodes [4-6]. В них чаще встречаются вирусы и бактерии, причем возбудителей опасных для человека заболеваний в несколько раз больше, чем в обычных клещах. Кроме того, такие клещи становятся более агрессивными и могут одновременно переносить сразу несколько опасных для человека инфекций [6]. Таким образом, актуальность исследования элементного состава клещей несомненна, поскольку позволяет оценить не только эпидемиологическую обстановку в регионе, но и техногенное загрязнение окружающей среды. Ранее на кафедре аналитической химии НИ ТГУ была разработана классическая унифицированная методика анализа одной клещевой особи с применением метода дуговой атомно-эмиссионной спектроскопии (ДАЭС-МАЭС), заключающаяся в переводе элементов пробы на графитовый коллектор в процессе термической минерализации клеща в кратере графитового электрода (анод) с последующим испарением из него полученного концентрата (глубина, диаметр кратера - 0,004, 0,0045 м). Катодом служил электрод, заточенный в форме конуса. Условия регистрации спектров: постоянный ток 13 А; расстояние между электродами - 0,003 м; ширина щели - 3,0Й0-5 м; диафрагма - 0,005 м; накоплений - 160; длительность накоплений - 125 мс; полная экспозиция - 20 с [7]. Количественное определение 13 микроэлементов проводили с использованием спектроаналитического комплекса «Гранд» [8-10] относительно государственных стандартных образцов на основе графитового порошка СОГ-37 [11] с чувствительностью и-10-4 мкг и выше и относительным стандартным отклонением результатов 25-30% отн. Для расширения круга контролируемых элементов, снижения пределов их обнаружения может быть использован другой аналитический метод -48 Исследование содержания токсичных элементов в составе клещей масс-спектрометрия с индуктивно-связанной плазмой (ИСП-МС) [12], но для этого необходимо полное переведение пробы в раствор. Процедура эта длительная и трудоемкая. Она включает обработку клеща концентрированными HNO3 и H2O2 (7 и 2 мл соответственно) в системе микроволнового разложения Milestone Start D (200°С, 700 Вт), высушивание растворов до состояния влажных солей на электрической плите при температуре (110 ± 10)°С, последующее их растворение в 10 мл 15%-ной HNO3 со следами HF (на 1 л 15%-ной HNO3 - 2 мл HF) и с введением 0,1 мл раствора In в качестве внутреннего стандарта. Полученные таким образом растворы анализируют методом ИСП-МС на приборе Agilent 7500сх (выходная мощность генератора -1 500 Вт, тип распылителя - MicroMist (микроаэрозольный), распылительная камера - охлаждаемая, расход вспомогательного потока Ar - 0,2 л/мин, скорость подачи пробы - 0,1 об/мин), что позволяет количественно определить до 40 микроэлементов с содержанием в клеще и-10-6 мкг и выше. Относительное стандартное отклонение результатов определения ряда микроэлементов, содержание которых в клещах находится на пределе чувствительности, может превышать 30% отн. Несмотря на явные преимущества индуктивно связанной плазмы, метод ИСП-МС является дорогостоящим, к тому же он требует довольно длительного и трудоемкого процесса переведения пробы в раствор. На сегодняшний день самым доступным по стоимости проводимых анализов и простым в обращении источником возбуждения спектров является дуга постоянного тока. Поэтому в данной работе было решено использовать метод дуговой атомно-эмиссионной спектроскопии с цифровой регистрацией спектров (МАЭС). Анализ клещей парами и даже колониями, состоящими из 4-6 особей, объединенных по ареалам их обитания, не дал существенного снижения пределов обнаружения микроэлементов. Однако внимания заслуживает давно известный способ анализа сухих остатков проб с торцов графитовых электродов, который был использован Н.С. Соломенцевой и О.В. Шуваевой для определения микроэлементов (Cu, Mn, Pb, Zn, Cd, Fe, Al, Mg, Ca) в природных водах [13]. Метод заключается в том, что жидкую неорганическую пробу малого объема (начиная с 10 мкл) помещают на торец графитового электрода, высушивают, а затем регистрируют спектр полученного сухого остатка. Преимущества метода очевидны: простота пробоподготовки, снижение величины холостого опыта и пределов обнаружения микроэлементов, возможность градуировки с использованием ГСО водных растворов солей определяемых элементов. Поэтому целью данной работы явилась разработка более чувствительной методики количественного определения микроэлементов в индивидуальных особях клещей методом ДАЭС-МАЭС путем испарения сухого остатка пробы с торца электрода. Материалы и методы исследования Все применяемые в работе реактивы имели квалификацию не ниже ос.ч., графитовые электроды использовали марки ос.ч.-7-4. 49 В.И. Отмахов, Е.В. Петрова, И.С. Кускова, И.С. Черепанова Анализ проводили методом ДАЭС с использованием спектроаналитического комплекса «Гранд», включающего многоканальный анализатор эмиссионных спектров, полихроматор «Роуланд» и генератор «Везувий-3» [14, 15]. Комплекс зарегистрирован в Государственном реестре средств измерений под № 33011-06 и проходит ежегодную поверку (свидетельство о поверке № 55586/203 от 07.11.2018 г, действительно до 07.11.2019 г.). Рабочий спектральный диапазон 160-1 100 нм, пределы спектрального разрешения 0,005-0,3 нм, диапазон определения массовой концентрации элементов состава веществ и материалов 10-7-100%, предел допустимого значения среднеквадратического отклонения результатов определения массовой концентрации элементов состава веществ и материалов не более 10 мас. % Подготовка электродов к анализу. Электроды изготавливали из графитовых стержней: один электрод затачивали на конус, другой - на плоский торец. Для удобства нанесения растворов торец изготавливали слегка вогнутым, в виде лунки. Для снижения величины холостого опыта заточенную поверхность электродов очищали от поверхностных загрязнений и содержащихся в них примесей путем обжига в дуговом разряде в течение 8 с. Время обжига было выбрано экспериментально после изучения зависимости интенсивности (I) спектральных линий ряда элементов в чистом электроде от времени его предварительного обжига (тобж) (рис. 1). Из рис. 1 видно, что при силе тока 13 А достаточным временем обжига является 8 с. Более длительное воздействие дугового разряда на электрод ухудшает структуру его поверхностного слоя, который становится более рыхлым и пористым. Рис. 1. Зависимость интенсивностей спектральных линий ряда элементов (Ti, Zn, Mg) в чистом электроде от времени его предварительного обжига (от 0 до 16 с) 50 Исследование содержания токсичных элементов в составе клещей При нанесении стандартного раствора или раствора пробы на электрод может произойти диффузия элементов в объем электрода. Уменьшить диффузию удается полированием электрода, но, чтобы исключить ее полностью, необходимо создать на поверхности электрода сплошную непроницаемую защитную пленку. С этой целью электроды пропитывают (импрегнируют) растворами полимерных органических веществ в летучих органических растворителях с последующим их высушиванием. Наиболее универсальной считается полистирольная защита, так как полистирол обладает высокой кислото- и щелочестойкостью [16]. В данной работе для обеспечения защитного слоя, предотвращающего диффузию раствора в объем электрода, на поверхность каждого из электродов, заточенных на плоскость и подвергшихся обжигу, наносили по 20 мкл 1%-ного раствора полистирола в толуоле и высушивали под ИК-лампой при температуре не выше 60°С. Образуемая защитная пленка не только предотвращает диффузию, но и удерживает каплю на торце электрода. Выбор времени регистрации спектра (экспозиции). Время экспозиции выбирали на основании изучения кривых «испарения-возбуждения», отражающих временную динамику формирования аналитического сигнала. Исследование проводили на модельных образцах. Для этого 10 мкл стандартного раствора, содержащего 0,0001 г/л определяемых элементов, в первом случае наносили на торец предварительно обожженного и импрегнирован-ного полистиролом электрода, а в другом - на навеску графитового порошка массой 0,0150 г, помещенную в кратер графитового электрода (глубина, диаметр кратера - 0,004, 0,0045 м). Рис. 2. Зависимости интенсивности аналитической линии Cu (327,39 нм) от времени регистрации спектра: • - испарение сухого остатка с торца электрода; ■ - классический способ испарения графитового концентрата из канала электрода 51 В.И. Отмахов, Е.В. Петрова, И.С. Кускова, И.С. Черепанова Противоэлектродом служил электрод, заточенный в форме конуса. При этом содержание элементов в исследуемых образцах составляло 0,001 мкг. Изучение процессов поступления атомов из канала электрода в зону разряда и с торца электрода осуществляли с помощью построения кривых «испарения-возбуждения», полученных путем регистрации спектра каждые 2 с до полного выгорания пробы. На рис. 2, 3 приведены зависимости интенсивности аналитической линии Cu (327,39 нм) и Zn (213,86 нм) от времени регистрации спектра при различных способах испарения. Рис. 3. Зависимости интенсивности аналитической линии Zn (213,86 нм) от времени регистрации спектра: • - испарение сухого остатка с торца электрода; ■ - классический способ испарения графитового концентрата из канала электрода Как следует из рис. 2, 3, при классическом способе испарения графитового концентрата из канала электрода характерно постепенное поступление элементов в разряд в течение 20 с, а в случае испарения сухого остатка с торца электрода элементы поступают в зону разряда за 8 с. Поэтому регистрацию спектров при испарении сухого остатка с торца электрода следует осуществлять в течение 8 с. При меньшем времени экспозиции уменьшается накопление фона, что положительно сказывается на соотношении полезный сигнал/шум. Результаты и обсуждение Подготовка особи клеща к анализу методом сухого остатка. На электрод с защитной пленкой (раствор полистирола в толуоле) помещали особь клеща, предварительно взвесив ее на аналитических весах. Для устранения органической составляющей пробу минерализовали. Для разложения клеща можно использовать концентрированную H2SO4 или смесь концентри-52 Исследование содержания токсичных элементов в составе клещей рованной HNO3 с добавкой Н2О2. Из литературных данных известно, что полистирол обладает высокой кислото- и щелочестойкостью. Однако он стоек к неорганическим неокисляющим кислотам (HCl, H2SO4, HF) и довольно легко окисляется. Поэтому для минерализации органической составляющей клеща была выбрана H2SO4. В литературе изучался вопрос возможности образования водорастворимой полистиролсульфокислоты. В [16] показано, что при обработке полистирола серной кислотой образуется водонерастворимый гелеобразный полимер, в котором содержание серы превышает содержание сульфогрупп, что говорит о возможности возникновения поперечных связей между макромолекулами за счет образования сульфоновых групп. Следовательно, защитная полимерная пленка электрода остается такой же водонепроницаемой после обработки серной кислотой, как и до обработки. На этом основании для устранения органической составляющей на электрод с клещом вносили 10 мкл концентрированной H2SO4 и высушивали под ИК-лампой при температуре не выше 60°С. Выбор концентрации легкоионизируемой добавки NaCl. В эмиссионном анализе для стабилизации температуры плазмы дугового разряда широко применяется NaCl. При классическом способе испарения в кратер электрода с пробой или стандартным образцом (СО) вносят 20 мкл полуспиртового раствора натрия хлорида с концентрацией 2,25 мас. % по Na. При этом в пробе или СО массой 0,015 г, находящемся в кратере электрода, создается концентрация Na, равная 3 мас. %, что вполне достаточно для стабилизации плазмы дугового разряда. Однако при испарении проб сухих остатков с торца электрода оптимальное количество натрия может быть другим. Для выбора количества вносимой добавки NaCl на торцы 4 электродов, предварительно подготовленных к анализу, вносили сначала по 10 мкл стандартного раствора элемента с концентрацией 0,1 мг/л, высушивали под ИК-лампой, затем на один из электродов вносили 10, на другой - 20, на третий - 30 мкл 1%-ного раствора NaCl. После каждой добавки 10 мкл раствора NaCl электрод сушили под ИК-лампой при температуре не выше 60°С. В один из электродов хлорид натрия не добавляли. Спектры полученных таким образом проб регистрировали в течение 8 с при постоянном токе 13 А на спектрометре «Гранд». Измеряли относительную интенсивность спектральных линий контролируемых элементов (Mg, Al, Cu, Zn) и строили графики зависимости интенсивности их спектральных линий от массы NaCl на торце электрода (рис. 4). Как видно из рис. 4, уже при добавлении 10 мкл 1%-ного раствора NaCl интенсивность линий контролируемых элементов достигает максимума. Поэтому введение нескольких добавок NaCl нецелесообразно. Однако состав клещей сложный, они могут содержать макрокомпоненты, влияющие на интенсивность определяемых микроэлементов. Поэтому необходимо было количественно их определить в отдельной особи клеща. Количественное определение макроэлементов в пробе клеща. Для определения макроэлементов использовали ранее разработанную унифицированную методику анализа одной особи клеща с применением метода 53 В.И. Отмахов, Е.В. Петрова, И.С. Кускова, И.С. Черепанова ДАЭС-МАЭС. Подготовку проб выполняли следующим образом: в чистую прокаленную до постоянной массы кварцевую чашку помещали часть графитового порошка (ГП), на поверхности которого размещали предварительно взвешенную особь клеща и присыпали другой частью графитового порошка (в сумме масса ГП составила 50 мг). Чашку с содержимым прокаливали при температуре 450°С в течение часа. После тщательной гомогенизации зольного остатка его навески массой 0,015 г помещали в графитовый электрод (не менее 3 параллельных) и испаряли из канала (анод) электрода (глубина, диаметр кратера - 0,004, 0,0045 м). Катодом служил электрод, заточенный в форме конуса. Рис. 4. Зависимость интенсивности аналитических линий Mg 277,98 нм, Al 308,22 нм, Cu 327,39 нм, Zn 213,86 нм от массы NaCl на торце электрода Анализ проводили на спектрометре «Гранд» относительно ГСО СОГ-37 [11]. В электроды с пробами и образцами сравнения в качестве стабилизирующей добавки вводили 20 мкл полуспиртового раствора натрия хлорида c массовой долей 2,25 мас. %, так чтобы концентрация в пробе Na соответствовала 3 мас. %. Содержание элементов в клеще (табл. 1) рассчитывали по формуле: (Хпр - Ххол ) ^аналита ~ ^клеща "100 с (мкг/г) = где хпр - среднее содержание элемента (%), найденное по графику в анали-те; ххол - среднее содержание элемента (%), найденное по графику в холостой пробе; таналита - масса аналита (0,0500 г угольного порошка + 1 клещевая особь) после озоления; дклеща - исходная навеска клеща (г); 106/100 = = 104 - переводной множитель для пересчета массовой доли (%) в мкг/г. 54 Исследование содержания токсичных элементов в составе клещей Таблица 1 Содержание макроэлементов в одной особи клеща, найденное методом ДАЭС-МАЭС (п = 3; Р = 0,95) № п/п Элемент Содержание элемента В концентрате (аналит), (хпр - ххолмас. % В клеще, мкг/г 1 P 0,018 ± 0,004 9 200 ± 1 840 2 Na* 0,008 ± 0,002 4 200 ± 1 050 3 Ca 0,0064 ± 0,0016 3 200 ± 800 4 K* 0,0051 ± 0,0013 2 550±638 5 Mg 0,0015 ± 0,0005 750 ± 225 6 Fe 0,0011 ± 0,0003 565 ±170 7 Si 0,0007 ± 0,0002 340±102 8 Al 0,00031 ± 0,00009 155 ± 47 * Результаты определения элемента получены методом ПФ. Как следует из данных табл. 1, суммарное содержание в одной особи клеща макроэлементов Na, Ca, K, Р (0,004, 0,0032, 0,0026, 0,009 мг соответственно) не превышает содержания вводимой добавки NaCl (0,1 мг Na). Поэтому эффективные параметры плазмы дугового разряда, условия испарения и возбуждения будут задаваться преобладающим элементом (натрий). Они будут одинаковыми как для проб, так и для стандартных образцов и не будут зависеть от макросостава анализируемого объекта. Приготовление стандартных образцов и построение градуировочных характеристик для метода сухого остатка. Образцы сравнения для количественного определения микроэлементов в клещах готовили аналогично пробам, но без клещей: электрод импрегнировали 20 мкл 1%-ного раствора полистирола в толуоле, затем высушивали. Наносили на электрод 10 мкл стандартного раствора суммы элементов определенной концентрации (табл. 2), 10 мкл концентрированной H2SO4, 10 мкл 1%-ного раствора NaCl. После каждой процедуры нанесения раствора высушивание проводили под ИК-лампой при температуре, не превышающей 60°С. Спектры полученных таким образом CO регистрировали в течение 8 с при постоянном токе 13 А на спектрометре «Гранд». Т аблица 2 Данные для построения градуировочного графика Zn 213,86 нм № lgZ, отн. ед. Сст. раствора, г/л Ѵст. раствора, мкл т, мкг на электроде lgm, отн. ед. 1 3,5 0,01 10 0,1 -1 2 2,8 0,001 10 0,01 -2 3 1,6 0,0001 10 0,001 -3 4 0,7 0,00001 10 0,0001 -4 5 -0,8 0,000001 10 0,00001 -5 Растворы сравнения для построения градуировочных графиков готовили путем разбавления бидистиллированной водой стандартных многоэле-55 В.И. Отмахов, Е.В. Петрова, И.С. Кускова, И.С. Черепанова ментных растворов ГСО РМ-2 [17] и ГСО РМ-3 [18] с концентрацией элементов 1 мг/мл. При приготовлении градуировочных растворов использовали способ последовательного разбавления стандартного раствора бидистиллированной водой с уменьшением концентрации в 10 раз. На рис. 5 в качестве примера приведен градуировочный график для количественного определения Zn 213,86 нм. Рис. 5. Градуировочный график для аналитической линии Zn 213,86 нм Проверка правильности методики определения микроэлементов методом ДАЭС путем испарения сухого остатка с торца электрода. Так как каждая проба клеща является уникальной, то проверить правильность результатов ее анализа методом сухого остатка возможно только с использованием стандартных растворов. Для исключения наличия систематической погрешности воспользовались методом удвоения аликвоты одного и того же образца. При отсутствии систематической погрешности при увеличении аликвоты в 2 раза содержание определяемого элемента должно увеличиться также в 2 раза, т.е. должно выполняется равенство 2т і = m2, где т\\ - содержание определяемого элемента при Ѵшиквоты і (элемента) = = 10 мкл (мкг); m2 - содержание определяемого элемента при Ѵаликвоты 2 (элемента) = 20 мкл (мкг). При наличии систематической погрешности (А) такое равенство будет получено только после вычитания: ml - A m2 - A 56 Исследование содержания токсичных элементов в составе клещей Поскольку Va2 = 2Va1, то A = 2m1 - m2 . Для нахождения величины А анализировали несколько проб (не менее трех). Вычисляли среднее арифметическое значение A и сравнивали его с нулевым значением по t-критерию A - 0 где m - число проанализированных проб; SA - стандартное отклонение величины А: Sa = К A - A)2 m - 1 Вычисленное значение tA сравнивали с табличным t(P=0>95; и=з) = 4,3. Если tA < txafti, то постоянная систематическая погрешность отсутствует. Для проверки правильности методики образцы готовили аналогично пробам, но без клещей. Электроды импрегнировали 20 мкл 1%-ного раствора полистирола в толуоле, затем высушивали. На одну серию электродов наносили 10 мкл стандартного раствора определяемого элемента c с(М) = 0,0001 г/л, 10 мкл концентрированной H2SO4, 10 мкл 1%-ного раствора NaCl. На вторую серию электродов - 20 мкл стандартного раствора того же элемента c с(М) = 0,0001 г/л, 10 мкл концентрированной H2SO4, 10 мкл 1%-ного раствора NaCl. После каждой процедуры нанесения проводили высушивание под ИК-лампой при температуре, не превышающей 60°С. Спектры полученных таким образом проб регистрировали в течение 8 с при постоянном токе 13 А на спектрометре «Гранд». По градуировочным характеристикам для контролируемых элементов определяли их содержание в стандартных образцах и по полученным данным проводили проверку правильности (т.е. определяли наличие / отсутствие систематической погрешности) (табл. 3). Т аблица 3 Проверка правильности определении Co 242,49 нм, Pb 280,19 нм, Be 234,86 нм методом сухого остатка (п = 3; P = 0,95; £Табл = 4,3) Эле мент Введено с(М) = 0,0001 г/л Найдено на электроде А = = 2m1 - m2 Sa tA V1, мкл V2, мкл mi, мкг m2, мкг Со 10 20 0,00092 0,0019 610-5 2,3 10-5 3,5 0,00101 0,0020 210-5 0,00102 0,0021 610-5 Pb 10 20 0,00085 0,00180 1,010-4 1,010-2 1,1 0,00990 0,00210 1,810-2 0,00111 0,00214 8,0 10-5 Be 10 20 0,0009 0,0019 110-4 5,810-5 4,0 0,0011 0,0020 2-10-4 0,0012 0,0023 110-4 57 В.И. Отмахов, Е.В. Петрова, И.С. Кускова, И.С. Черепанова Как следует из данных табл. 3, tA < ?табл, следовательно систематическая погрешность определения микроэлементов методом сухого остатка отсутствует. Результаты количественного определения микроэлементов в единичной особи клеща, полученные по разработанной методике. Учитывая условия, подобранные выше, можно предложить следующую методику анализа пробы одной особи клеща методом ДАЭС-МАЭС путем возбуждения сухого остатка с торца электрода. Графитовые стержни марки ос. ч-7-4 обтачивали с помощью металлических фрез для придания им нужной формы: один электрод затачивали на конус, другой - на плоский торец, слегка вогнутый, в виде лунки. Электроды обжигали в дуге постоянного тока при I = 13 А в течение 8 с. После обжига электрод, заточенный на плоский торец, импрегнировали 20 мкл 1%-ного раствора полистирола в толуоле, высушивали. После испарения толуола на электрод с защитной пленкой помещали предварительно взвешенную на аналитических весах особь клеща, вносили 10 мкл концентрированной H2SO4, высушивали. И в конце наносили на электрод 10 мкл 1%-ного раствора NaCl. После каждой процедуры высушивание проводили под ИК-лампой при температуре, не превышающей 60°С. Т аблица 4 Содержание микроэлементов в единичной особи клеща, найденное методом дуговой атомно-эмиссионной спектрометрии путем возбуждения сухого остатка с торца электрода № Элемент Содержание в клеще, мкг № Элемент Содержание в клеще, мкг 1 Mn 0,064 ± 0,016 10 Sn 0,0034 ± 0,0010 2 Zn 0,0045 ± 0,0014 11 Pb 0,0013 ± 0,0004 3 B 0,0037 ± 0,0011 12 Mo* < 0,0010 4 Ba 0,0026 ± 0,0009 13 Sb 0,0007 ± 0,0002 5 Ti* < 0,0010 14 Co 0,00060 ± 0,00018 6 Cr 0,0021 ± 0,0006 15 Li 0,00025 ± 0,00008 7 Ni 0,0017 ± 0,0005 16 Be 0,000010 ± 0,000003 8 Cu 0,009 ± 0,002 17 Cd < 0,00001 9 Rb 0,0054 ± 0,0016 18 Se < 0,00001 * Содержание указанных элементов ограниченно величиной холостого опыта. 58 Исследование содержания токсичных элементов в составе клещей Спектры полученных таким образом проб регистрировали в течение 8 с при постоянном токе 13 А на спектрометре «Гранд». Данные количественного анализа из программного обеспечения «Атом» экспортировали в MS Excel, где пересчитывали содержание микроэлементов в микрограммах. Полученные результаты анализа пробы клеща представлены в табл. 4. Заключение Методами ДАЭС-МАЭС, ФП определено содержание макроэлементов в клещах. Показано, что основными элементами (в порядке убывания, в мкг/г) являются P (9 200 ± 1 050), Na (4 200 ± 1 050), Са (3 200 ± 800), K (2 550 ± 638). Для повышения чувствительности метода ДАЭС, как одного из самых доступных и простых, проведены исследования по возможности анализа единичной особи клеща на содержание микроэлементов путем испарения сухого остатка с торца электрода. Выбраны оптимальные условия: время обжига электрода дугой постоянного тока 13 А - 8 с; время экспозиции - 8 с; количество усиливающей добавки NaCl - 0,1 мг на электрод. Предложена методика количественного определения микроэлементов в индивидуальных особях клещей методом ДАЭС путем испарения сухого остатка с торца электрода. Правильность методики доказана путем анализа стандартного образца методом удвоения аликвоты. По предложенной методике проведен анализ единичной пробы, показана возможность количественного определения до 18 микроэлементов, содержание которых в клеще составляет пД0-6 мкг и выше, с воспроизводимостью результатов 20-25% отн. Предложенная методика может быть использована для определения влияния элементного состава отдельных особей клещей на зараженность возбудителями природно-очаговых инфекций.

Скачать электронную версию публикации